Ingéniérie des cellules souches du sang de cordon et du placenta pour la médecine régénérative – EUROCORD Lab

Le projet EUROCORD Lab associe MACO PRODUCTION SSAS, Eurocord Associatio, l'INSERM, l'AP-HP et l'Université Paris XI. Les objectifs du projet sont :
1. Développer des procédés biotechnologiques innovants pour le recueil du sang de cordon (SC) et son stockage (banking)
2. Optimiser le recueil du sang foetal du placenta
3. Amplifier les cellules souches mésenchymateuses (MSC) et les progéniteurs endothéliaux circulants (EPC) pour le banking et de promouvoir des applications thérapeutiques en médecine régénérative

Grâce à ce projet, nous espérons obtenir les résultats suivants :
Produire et améliorer les outils pour le recueil du SC et du placenta dans des conditions sécurisées
Amplifier les MSC et EPC du SC
Obtenir des conditions de culture de grade clinique pour ces cellules grâce à des système de culture clos et des milieux de culture définis contenant facteurs de croissance plaquettaires obtenus par fractionnement de plasma riche en plaquettes.
Développer des produits de thérapie cellulaire de haute qualité en utilisant des kits d¿expansion pour les MSC et PEC prêts à l'emploi
Développer des biobanques de MSC et PEC de grade GMP
Initier des essais clinques

Notre ambition est d'améliorer la qualité et la sécurité dans préparation des produits de thérapie cellulaire et de créer un label Français de référence dans le domaine. Les développements économiques de ce projet répondront aux normes réglementaires et éthiques Françaises et Européenn//Les avancées récentes sur les cellules souches du sang de cordon (SC) ont apporté un éclairage nouveau sur la médecine régénérative. Les sources actuelles de cellules souches, embryonnaires et adultes, présentent chacunes des limites : considérations éthiques et tumorigènicité potentielle pour les premières, potentiel plus limité pour les secondes. Ainsi, les cellules souches du SC représentent une solution alternative et innovante pour recueillir des cellules souches pluripotentes, non controversées au plan éthique, et, de surcroit, facilement accessibles pour des applications en recherche et en clinique.
Comparées à d¿autres recherches en médecine régénérative, les cellules souches du SC offrent des avantages compétitifs : 1/ Les applications thérapeutiques ont été prouvées par 20 ans d¿applications cliniques; 2/ Les cellules souches du SC sont pluripotentes sans être tumorigènes; 3/ Elles n¿impliquent ni embryons humains ni clonage, et ne sont donc pas limitées par des contraintes éthiques. 4/ Le Pr Gluckman, pionnière des transplantations de SC en 1988, a su réunir des équipes de recherche de premier plan au sein du projet Eurocord Lab. Vingt ans après cette percée scientifique, le label Eurocord bénéficie d¿une solide réputation internationale. Aujourd¿hui, cet avantage compétitif se voit renforcé par un partenaire industriel de premier plan, Maco Productions, spécialisé dans l¿ingénierie des cellules souches du sang de cordon.
//Le projet associe dans une structure cohérente des partenaires clefs avec des objectifs complémentaires :
- Maco Productions, entreprise internationale, spécialisée dans les dispositifs médicaux pour la thérapie cellulaire, développant sa recherche dans l¿ingénierie des cellules souches du SC
- L¿association Eurocord, centre d¿excellence international de recherches cliniques sur la transplantation du SC
- Le laboratoire de thérapie cellulaire de l¿hôpital St Louis, spécialisé dans l¿ingénierie des cellules souches
- L¿Inserm U602, comparant les propriétés spécifiques des cellules souches adultes, f¿tales et embryonnaires
- Le laboratoire UPRES EA 2706, Univ Paris-XI, spécialisé dans la biologie prénatale et les cellules souches du placenta.
Eurocord lab générera de multiples interactions et synergies entre chercheurs, cliniciens et industriels. C¿est grâce à ces avantages compétitifs qu¿Eurocord a été labellisé par Medicen en 2006.
// 1 Banque de sang de cordon
M1 Définition des procédés et de la caractérisation du produit final
D1 Optimisation et standardisation du procédé de collecte
D2 Traçabilité et sécurité
D3 procédé de stockage
Cette étape ne comporte pas de risque. Il s'agit de l'optimisation de méthodes existantes

2 Collecte du sang du placenta
M1 Qualification, stockage et distribution
M2 Validation de la viabilité des cellules souches (SC) du placenta et nouvelles méthodes de collecte
D1 Optimisation et standardisation de la collecte
D2 Traçabilité et sécurité
D3 Critères de viabilité des SC
D4 Mobilisation des SC
Le placenta retient un important volume de sang. La mobilisation des SC est une option, pas une étape critique

3 Optimisation des milieux de culture pour les MSC et les EPC
M1 Définition de milieux spécifiques pour l¿expansion de ces cellules
M2 Validation des propriétés fonctionnelles des cellules
M3 Validation GMP
M4 AMM AFSSAPS
D1 Optimisation de la collecte des SC
D2 Définition, production et validation d'un prototype de milieu
D3 Fabrication pré-industrielle
Un milieu (non GMP) ayant la même composition est validé sur les MSC, mais pas encore sur les EPC. S¿il n¿est pas adaptable, les premières étapes d¿amplification des EPC seront réalisées en SVF, puis un milieu sans sérum sera utilisé pour les dernières étapes ¿amplification.

4 Développement d¿un système de culture clos miniaturisé
M1 Validation du plastique
M2 Validation des SC amplifiées dans le système
M3 Validation GMP et AMM AFSSAPS
D1 Sélection du matériel brut
D2 Production du prototype
D3 Validation du prototype sur l¿amplification des MSC/EPC
D4 Fabrication pré-industrielle du système
L'étape critique est l'adhérence des SC au plastique. Si les cellules n'adhèrent pas dans le système clos, cette étape sera réalisée en système ouvert, le transfert en système clos étant réalisé le plus tôt possible.


5 Validation fonctionnelle des produits de thérapie cellulaire
M1 Validation des marqueurs phénotypiques
M2 Validation des propriétés fonctionnelles in vitro et dans des modèles animaux correspondants aux pathologies ciblées
D1 Validation des marqueurs phénotypiques
D2 Validations fonctionnelles in vitro
D3 Validation in vivo dans le modèle animal sélectionné
Les marqueurs et les tests fonctionnels sont déjà sélectionnés. Nous proposons des optimisation de ces méthodes

6 Conception et évaluation des essais cliniques
M1 Définition des standards et des recommandations
M2 Essais pilotes et phase I
M3 Préparation des phases II et III
D1 Discussion du protocole
D2 Recrutement des centres participants
D3 Ethique et réglementation
D4 Analyse des données et publications

7 Coordination
Elle est assurée par le coordinateur et les responsables des work packages.



//Maco Productions détient quatre brevets sur l¿optimisation de la collecte du sang de cordon :
- Brevet 1 : Ligne de collecte de sang placentaire incluant une poche de rinçage
- Brevet 2 : Appareils et procédés destinés à l¿homogénéisation des fluides biologiques et de l¿anticoagulant
- Brevet 3 : Procédés, systèmes et appareils destinés à la collection d¿un fluide biologique auquel un volume adéquat de solution est ajouté
- Brevet 4 : Système de poche de prélèvement avec une tubulure préformée

Le comité de pilotage Eurocord Lab se chargera de l¿évaluation des droits de propriété intellectuelle du projet. Les inventions générées seront la propriété des institutions des différents membres du consortium, relativement à leur contribution respective. Le comité de pilotage protégera les résultats ayant un potentiel d¿exploitation commercial, avant leur publication.