Toxines bactériennes agissant sur l'intégrité de l'endothélium – ENDOTHELTOX

Les cellules endothéliales tapissent la surface interne des vaisseaux et offrent une barrière active entre le compartiment vasculaire et les tissues. La perméabilité vasculaire s'opère par ouverture des jonctions intercellulaires par contraction du cytosquelette d'actine des cellules endothéliales, ainsi que par formation de pores transcellulaires de différentes natures, contrôlés par le cytosquelette d'actine. La formation de larges pores transcellulaires est aussi essentielle à la diapédèse des lymphocytes au travers des cellules endothéliales. Le but de notre étude et de mieux établir comment les bactéries pathogènes corrompent l'intégrité de l'endothélium, et de sa composante cytosquelette d'actine, par leur action sur les voies de signalisation contrôlées par RhoA et les MAPKK et l'importance de la réponse génétique dans le control du cytosquelette d'actine.//Notre projet a pour ambition de présenter une vision intégrée, signalisation/réponse génétique, de l'effet de deux toxines de bactéries pathogènes, ciblant les GTPases Rho (EDIN de S. aureus) et les kinases de la famille MAPK (LT de B. anthracis), sur la réorganization du cytosquelette d'actine et ces conséquences sur l'intégrité de l'endothélium. Ce projet est basé sur (i) notre découverte que l'inactivation de RhoA par l'EDIN de S. aureus induit la formation de tunnels transitoires dans les cellules endothéliales (ii) sur nos résultats non publiés que l'observation faite d'induction de cables d'actine produite par l'inactivation des MAPKK par la toxine LT de B. anthracis, s'opère au travers d'un changement de profil génétique lors de l'intoxication. Nous chercherons à déterminer (i) la cinétique des gènes induits (ii) la cinétique de modification des voies de régulation du cytosquelette d'actine pour les deux toxines. Notamment nous déterminerons l'impact de la réponse génétique sur la régulation du cytosquelette d'actine. (iii) Nous étudierons l'impact de ces toxines sur l'intégrité de l'endothélium et le effet d'une toxine chimérique LT/EDIN fonctionnelle construite dans notre laboratoire. (iv) Enfin, nous prévoyons avec l'équipe-2 de déterminer la conséquence de l'inactivation de RhoA, dans des modèles animaux d'infection par des souches bioluminescentes de S. aureus que nous avons construites.//Notre étude doit mieux établir comment les bactéries pathogènes compromettent l'intégrité de l'endothélium, en ciblant l'organisation du cytosquelette d'actine des cellules endothéliales de part leur action sur les voies Rho et MAPKK et le contrôle de l'expression génique. Ceci doit aussi offrir une meilleure connaissance du role de l'inactivation de RhoA par EDIN durant l'infection par S. aureus et du mode d'action de la toxine LT de B anthracis sur la perte d'intégrité de l'endothélium. Notre étude doit avoir un apport plus général sur les phénomènes de régulation de la perméabilité vasculaire.