– PHOSPHOINOPLAT

Les plaquettes sanguines jouent un rôle clé dans l'hémostase normale mais sont également impliquées dans différentes pathologies comme les thromboses ou l'athérosclérose. Leur dérégulation peut entraîner des saignements graves ou des thromboses artérielles, qui sont la première cause de crise cardiaque ou d'infarctus. Il a récemment été montré que les plaquettes sont également impliquées dans l'angiogénèse, la dissémination métastasique ainsi que dans les réactions inflammatoires et immunitaires. Comme les plaquettes et les interactions plaquettes / vaisseaux jouent un rôle important dans ces pathologies, l'inhibition de l'activation plaquettaire devient une stratégie thérapeutique pour prévenir les maladies ischémiques comme les infarctus du myocarde ou les artériopathies périphériques. - Dans ce projet nous nous focaliserons sur les D3-phosphoinositides (D3-PI) et les voies de signalisation dépendantes de ces derniers. Nous nous intéresserons plus particulièrement à l'impact de ces voies sur le remodelage du cytosquelette, étape indispensable pour que le changement de forme, l'adhésion et l'agrégation plaquettaire consécutive à l'activation des intégrines, puissent avoir lieu. - Nos précédant résultats suggèrent que la PI3K p110béta de la classe IA joue un rôle majeur dans l'activation plaquettaire. Afin d'évaluer l'intérêt potentiel de cette isoforme de PI3K en tant que nouvelle cible pour les thérapie anti-thrombotiques, nous allons générer un modèle de souris qui présentera une inactivation de la sous unité catalytique p110béta de la PI3K uniquement dans la lignée mégacaryocytaire. La caractérisation de ce modèle murin est un projet ambitieux qui nous permettra d'étudier le rôle précis de cette isoforme de PI3K lors de l'activation plaquettaire et de la formation du clot in vivo. Cette approche devrait également nous permettre de poser des questions clés en ce qui concerne la signalisation en aval des PI3Ks. - Par ailleurs, les plaquettes issues de souris déficientes pour la phosphoinositide 5-phosphatase SHIP1 présentent une accumulation très importante de PtdIns(3,4,5)P3 et une absence de PtdIns(3,4)P2 qui est corrélée à une organisation anormale du cytosquelette et de l'appareil contractile. Afin de mieux comprendre le phénotype de ces plaquettes et pour clarifier la relation D3-phosphoinositides / cytosquelette, nous étudierons en détail l'organisation du cytosquelette en absence de SHIP1. Comme SHIP1 peut agir en tant que 5-phosphatase ou en tant que protéine adaptatrice, nous étudierons via une approche de protéomique, le rôle de SHIP1 en tant que docking protéine. Les cibles du PtdIns(3,4)P2, le lipide reflétant l'activité 5-phosphatase de SHIP1, seront également recherchées. - Ce projet combine des approches in vivo et in vitro pour étudier en détail le rôle de deux enzymes clés du métabolisme des phosphoinositides et de leurs produits, dans les fonctions plaquettaires. En plus d'une meilleure connaissance quant au rôle joué, et à la signalisation dépendante des D3-phosphoinositides, la finalité de ce projet est d'identifier de nouveaux mécanismes moléculaires et de nouvelles cibles pharmacologiques pour améliorer le traitement des thromboses et des pathologies dues aux plaquettes en général. - ...