– BcellMemory

1-Contexte scientifique et objectifs du projet Les réponses immunes aux pathogènes peuvent aboutir à une protection face à la réinfection ou être inefficaces dans le contrôle de la maladie. Les facteurs contrôlant ces réponses ne sont pas tous bien connus. La protection contre l'infection requiert l'établissement de réponses immunes secondaires efficaces. La mémoire immunitaire nécessite la production de lymphocytes B et T mémoires spécifiques. Les cellules B mémoires expriment des récepteurs de forte affinité sélectionnés au cours des réponses primaires dans des zones spécialisées des organes lymphoïdes. La production et la sélection des cellules B mémoires sont T dépendantes et impliquent des mécanismes moléculaires distincts : commutation isotypique et hypermutation somatique. Toutefois, le programme de différenciation des cellules B imprimé au cours de ces réponses ainsi que les propriétés biologiques assurant une réponse anticorps efficace et le maintien à long terme de la mémoire ne sont pas encore totalement établis. 2-Description du projet Les programmes de différenciation des cellules B durant les réponses immunes ainsi que les propriétés biologiques assurant des réponses anticorps secondaires efficaces et le maintien de la mémoire ne sont pas encore bien établis. Nous proposons de comparer les propriétés biologiques des cellules B monoclonales naïves et mémoires de spécificité antigénique connue et de corréler ces propriétés à leur profil d'expression génique. Jusqu'ici ces études étaient impossibles, en raison du nombre insuffisant de cellules B mémoires de spécificité antigénique connue. Chez les souris BCR Tg conventionnelles l'insertion du transgène se produit au hasard et ne permet ni la commutation isotypique ni la production de cellules B mémoires. Nous utiliserons des souris SWHEL dont les cellules B anti-HEL peuvent effectuer une commutation isotypique et une hypermutation somatique (SHM). Sur fond Rag-/-, ces souris ne produiront qu'une population monoclonale de cellules B spécifiques de HEL. Les cellules T étant nécessaires à l'induction de la mémoire B, nous utiliserons des cellules T CD4 monoclonales spécifiques de HEL provenant de souris TCR Tg sur fond Rag-/-. Nous utiliserons ces modèles de souris pour produire des cellules B mémoires dans des quantités suffisantes pour permettre leur caractérisation fonctionnelle. Le comportement des cellules B mémoires sera comparé à celui de populations de cellules B naïves du même clone. L'aspect innovateur et unique de notre approche expérimentale nous permettra d'obtenir des réponses importantes à plusieurs questions fondamentales. Les besoins pour la survie des cellules B mémoires, les cinétiques des réponses à l'antigène des cellules B mémoires, le rôle des cellules T spécifiques dans la survie des cellules B mémoires, leur localisation tissulaire, les étapes de différenciation et les mécanismes de sélection préférentielle des cellules B mémoires de haute affinité et les profils d'expression géniques des cellules B naïves et mémoires. 3-Résultats attendus Dans ce projet, nous nous proposons de comparer les propriétés biologiques des populations monoclonales de cellules B naïves et mémoires de spécificité antigénique connue. Nous espérons améliorer notre compréhension des mécanismes conduisant à la génération et à la sélection des cellules B mémoires, ainsi qu'au maintien à long terme des réponses anticorps secondaires. Les résultats de ces études pourraient avoir de nombreuses retombées pratiques tels que a) le développement d'approches pour la génération de cellules B mémoires pouvant être utilisées dans la thérapie d'individus immuno-compromis, par exemple après transplantation de MO et b) le développement de nouvelles stratégies vaccinales.