Effets chroniques et mutagènes/cancérogenèses de contaminants de l'environnement évaluées à l'aide de cellule d'un hépatome humain (HepaRG) métaboliquement compétentes – HEPACELLTOX

Il n’existe pas à l’heure actuelle de modèle prédictif de la toxicité chronique de composés chimiques qui nécessitent une activation métabolique chez l’homme. Ce projet vise à valider le modèle d’hépatome humain, HepaRG, qui représente la seule lignée cellulaire connue exprimant des taux de cytochromes P450 comparables à ceux exprimés dans des cultures primaires d’hépatocytes humains, pour l’étude de la toxicité chronique et des effets mutagènes/cancérogènes de contaminants de l’environnement et de l’alimentation. Ces cellules ont comme originalité de pouvoir, à confluence, rester différenciées pendant plusieurs jours puis, lorsqu’elles sont remises en culture, de retrouver des caractéristiques de cellules indifférenciées (cellules souches) pendant une phase de prolifération active avant de se redifférencier à nouveau. Il s’agira de démontrer que des toxiques de l’environnement induisent les lésions attendues consécutives à leur biotransformation (mort cellulaire ou formation d’adduits, altérations chromosomiques) suite à des expositions aiguës ou répétées et que des mutations géniques induites par une exposition brève à un agent génotoxique peuvent conduire après plusieurs divisions cellulaires à l’apparition de clones cellulaires ayant des caractéristiques morphologiques, fonctionnelles et de croissance différentes de celles des cellules non traitées. Une attention particulière sera portée aux effets d’expositins réitérées à faibles doses. Les composés testés incluront des amines aromatiques hétérocycliques, l’acrylamide, le 3-monochoropropane-1,2-diol, la microcystine LR et l’aflatoxine B1 utilisée comme molécule de référence. Ce projet fera appel à des lignées de cellules HepaRG « sauvages » et invalidées pour des gènes cibles du métabolisme de ces contaminants et à des méthodes de mise en évidence d’atteintes cellulaires (apoptose,…) et d’altérations de l’ADN (mesure d’adduits, tests des comètes et des micronoyaux) et à l’analyse du transcriptome. pour la recherche de marqueurs d’exposition. Cette étude devrait aboutir à proposer une nouvelle stratégie d’évaluation des effets chroniques et mutagènes/cancérogènes de molécules chimiques in vitro et à confirmer ou non les effets suspectés de certains contaminants de l’environnement et de l’alimentation chez l’homme.